Felicia, Mitzi en Bernadette zijn drie cabaretmeisjes uit Sydney, die voor een aantal optredens worden uitgenodigd in een hotel in Alice Springs, een stad in het hart van de Australische woestijn. Als vervoermiddel kiezen ze voor een roze geschilderde bus, die ze tot Priscilla dopen. Omdat Priscilla het onderweg regelmatig laat afweten, zijn de drie reizigers verplicht hun tijd te doden in stoffige dorpjes en provincienesten waar hun aanwezigheid niet onopgemerkt blijft. Want de drie passanten zijn geen gewone meisjes: Felicia en Mitzi zijn travestieten, terwijl Bernadette een transseksueel is.